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La Técnica de Clonación en el Desarrollo de Vacunas

El caso de la Cepa Clone 30 (La Sota)

Francisco Ríos Cambre

INTRODUCCIÓN

La enfermedad de Newcastle (ENC), continúa siendo una de las enfermedades aviares más importantes. Debido a que la amenaza está siempre presente, es necesario mantener un alto nivel de inmunidad contra la ENC.

A pesar de su eficacia, las vacunas vivas lentogénicas clásicas en el mercado presentan limitaciones. De cara a un desafío severo, la clásica vacuna Hitchner B1 no es capaz de conferir una adecuada protección en el campo, particularmente en presencia de anticuerpos maternos. Además, la cepa Hitchner B1 confiere inmunidad de duración limitada; de ahí que sea necesario efectuar revacunaciones.

Para superar estas limitaciones, se usan las cepas vacunales La Sota, que son más inmunogénicas. Sin embargo, la inmunización con estas vacunas puede causar severos trastornos sistémicos que resultan en un incremento en la mortalidad y reducción en el rendimiento.

¿En que consiste la Clonación viral?

El aumento en el conocimiento del virus de la ENC ha revelado que no todas las cepas vacunales que tienen el mismo nombre son idénticas. Se ha demostrado que las cepas lentogénicas del virus de la ENC, así como las mesogénicas y velogénicas, provienen de poblaciones virales genéticamente heterogéneas. En búsqueda para desarrollar una cepa vacunal de la ENC más inmunogénica y con un nivel aceptable de patogenicidad, los especialistas en la investigación de Intervet cultivaron varias cepas virales lentogénicas para purificar las posible subpoblaciones que se encontraran en ellas. Estos clones fueron después ensayados extensivamente para determinar su inmunogenicidad y patogenicidad.

Uno de estos clones, obtenido de una cepa vacunal La Sota, mostró tener un nivel de patogenicidad equivalente al de la clásica Hitchner B1. Sin embargo, también se encontró que confería mejor protección, especialmente cuando se administraba a pollos con anticuerpos maternos.

La clonación consiste en seleccionar una partícula viral específica y reproducirla millones de veces para producir una vacuna uniforme. En este caso, la cepa Clone-30 se usó para producir las vacunas conocidas como CLONEVAC-30®, CLONEVAC-30-Ma5® y COMBOVAC-30®, así como la línea de vacunas emulsionadas inactivadas para la prevención de la ENC.

Purificación de Placa o Clonación

Una cepa viral puede separarse en placas (áreas locales de crecimiento viral) inoculando dosis bajas en cultivo de tejidos. Cada placa representa un virus individual y tiene distintas características. Una vez se selecciona una placa que presente los atributos deseado, la semilla viral se usa para reproducción (Figura 1).

Cada clon se deriva de una sola partícula viral y se estudia para detectar características favorables. Únicamente la más deseable es seleccionada y reproducida para crear una vacuna uniforme en su sustrato original, en este caso en embrión de pollos SPF.

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